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超声波法主要利用超声的空机械振动和空化效应来破坏灵芝抱子细胞壁.例如,Alzorqi等利用超声波提取P-D-葡聚糖,在优化条件下p-D-葡聚糖的产量为5.228mg/g.微波法.微波法利用微波的穿透能力和热效应,使细胞内部的温度迅速上升,从而使细胞内部的压力超过细胞壁膨胀所能承受的压力而破碎,促使其有效成分释放.例如,先将灵芝抱子进行微波处理,而后在低温深加工,灵芝抱子的破壁率可达99%以上.超临界提取法.超临界提取法利用气体在超临界状态下的性质,即流体的性质,使有效成分被流体萃取,Li等M运用超临界CO2萃取技术提取灵芝抱子,萃取率达到37%.机械法机械法的优点是操作简单、易行;缺点是机械设备投资大、运行成本较高.
相关研究发现,灵芝抱子的作用主要由多糖、三萜等有效成分起作用.例如,Fukuzawa等19研究发现灵芝抱子中含有16~20个碳的长链脂肪酸,能够抑制各种癌细胞的增殖;Liu等閃通过气相色谱检测出含16个、18个碳的脂肪酸,具有抑制癌细胞增殖的作用,Gao等回发现含有19个碳的脂肪酸也具有抑制癌细胞增殖的作用,Shen等因发现灵芝抱子可以通过调节肝细胞和几种相关免疫细胞的miRNA来抑制人肝癌细胞HepG2的增殖,从而达到治疗肝癌的目的,在测定的61个miRNA中,miR-3131的表达多,Li等阴观察灵芝抱子的超临界CO2提取物对离体胆管癌的影响,发现其能抑制离体胆管癌的迁移,其作用主要是通过抑制TGF-01诱发上皮间质转化(EMT),从而抑制EMT胆管癌细胞的迁移.此外,其他相关研究还指出,灵芝抱子提取物对乳腺癌、前列腺癌、结肠癌等多种癌症治疗均有效果.
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四、混合料的加入与比例混合料是填充袋内段木与段木之间的主要物质,它是灵芝菌丝体初的营养源。其配方为:阔叶木屑75%、细米糠或麦麸21%、白糖或红糖1%、石膏1%、硫酸镁0.1%、合成色素0.3%、合成蛋白胨0.54%、灵芝生物素0.06%、腐质土1%,料水比为5:5。将硫酸镁、生物素、色素、合成蛋白胨、白糖溶入水中,与上述原料拌匀,填入已装好段木的栽培袋中,注意段木与段木之间的空隙一定要填实,料面超出段木面2厘米即可封袋,并立即进入灭菌程序。五、灭菌灭菌可采用高压或常温蒸笼,无论采用哪一种灭菌,都要考虑料之间的水蒸气流通,以收到充分灭菌的效果,采用高压灭菌的,升火前应打开放气阀门,当水蒸气大量喷发时,关闭放气阀,加大火力,当压力表盘为0.15帕次放气时开始计时,在此气压下持续4个小时即可停火。当压力表降至0帕时,打开放气阀排气,把压力锅门打开自然降温。采用常用灭菌的,在蒸笼底部一角放一支温度计,升火后温度至100°C时开始计时,维持12个小时后停火,闷上一夜,然后打开蒸。
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